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            成功案例
            細胞生物學功能和機制研究

            時間:2020-08-05 10:38:00 瀏覽:3853次

            實驗方案

            一、研究對象H9C2細胞株

            二、研究藥物1種測試藥

            、H9C2心肌細胞缺氧/復氧(hypoxiareoxygenation,H/R)模型的構建

            遵守快融的原則。先將水浴鍋調至37℃,從液氮罐里拿出凍存管迅速投入37℃溫水中,并輕輕搖動使其內容物迅速融化(最好在1 min以內),取出凍存管,微微上下晃動凍存管,用75%酒精消毒后開啟,用吸管吸出溶解后的細胞懸液,注入離心管并加入5mL的含10%胎牛血清(FBS)的細胞培養液。以1000rpm離心5min,除去上清液,加入1 mL培養液吹打,使其形成懸浮液。用含20%FBS的細胞培養液適當稀釋后,接種到培養瓶,置于37℃、飽和濕度、5%CO2孵箱中培養,24h后更換一次培養液,隨后視細胞生長情況及培養液顏色(一般待培養液變黃)更換培養液,繼續培養。 5% CO295 %N2孵箱中培養4h以模擬缺血環境,而后將細胞置于含 10%胎牛血清的高糖DMEM培養基中常規培養24h,模擬再灌注環境。

            、藥物****對缺氧/復氧心肌細胞模型的生物學功能的影響與機制研究

            (一)CCK-8檢測藥物處理對心肌細胞缺氧/復氧的影響

            (二)QPCR檢測Y基因的表達水平。

            (二)Western Blot檢測x蛋白的表達水平。

            (四)流式細胞儀檢測各組細胞凋亡水平。


            結果展示

            1、CCK-8檢測藥物處理對心肌細胞缺氧/復氧的影響

            2、藥物****對缺氧/復氧心肌細胞模型的生物學功能的影響與機制研究


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