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            蛋白質組學
            蛋白質譜分析

            時間:2020-07-20 14:44:00 瀏覽:5943次

            蛋白質經過蛋白酶的酶切消化后成肽段混合物,在質譜儀中肽段混合物電離形成帶電離子,質譜分析器的電場、磁場將具有特定質量與電荷比值(即質荷比,M/Z)的肽段離子分離開來,經過檢測器收集分離的離子,確定每個離子的M/Z值。經過質量分析器可分析出每個肽段的M/Z,得到蛋白質所有肽段的M/Z圖譜,即蛋白質的一級質譜峰圖。

            通過實際譜圖和理論上蛋白質經過蛋白酶消化后產生的一級質譜峰圖和二級質譜峰圖進行的比對,進行蛋白鑒定。


            設備儀器:

            美國安捷倫公司Agilent (xct-6330) 型號的液相色譜儀,MS為美國熱電公司的TSQ型號質譜儀;質譜儀采用ESI(電噴霧電離)離子源,MS/MS 串連四極桿分析器??稍诰€檢測極性有機化合物、核酸、多肽、小分子蛋白質及其化學修飾產品的實際分子量,并對送檢樣品進行分子量鑒定,純度及修飾效果分析。

            質量范圍M/Z 10~2,000 分辨率R=2M


            設備應用:

            芯片/質譜 (HPLC-Chip/MS) ——顯著提高了納流液-質聯用分析結果的靈敏度,可靠性和分析速度 安捷倫推出了世界第一臺的基于微流控技術的納流液相色譜芯片-質譜平臺。 這項技術將主要用于蛋白質組學和藥物分析方面。其核心是采用可重復使用的聚合物液相色譜芯片取代傳統的液相色譜柱。這個平臺將多維色譜集成在一塊芯片上,采用插拔式設計,操作簡單與標準液相色譜/質譜聯用儀相比, 它的其靈敏度提高了3,500倍。盡管芯片的體積很小,但是可以容納最長20 厘米的有C18填料的色譜柱。液相色譜/芯片作為一個模塊與安捷倫的所有6000系列液-質聯用儀完全兼容。 液相色譜-芯片技術主要應用蛋白質組學研究和藥物標靶研究等領域。有關的應用發表在許多國際知名的雜志上,如Analytical Chemistry; Electrophoresis, PNS上液相色譜芯片產品主要包括七種類型的芯片涵蓋大分子和小分子的應用:
            * 酶解蛋白質鑒定芯片

            * 酶解蛋白質鑒定芯片

            * 寡聚糖的芯片

            * 直接進樣芯片
            * 小分子芯片

            * 質譜校正和診斷芯片

            * 全蛋白質分析芯片


            測試范圍:
            多肽、蛋白質的電噴霧質譜分子量測定以及天然產物分子、生物大分子、有機分子的質譜測試和研究


            送檢樣品要求:

            樣品應盡量不含鹽份、離子表面活性劑、去垢劑及一些難揮發性鹽。樣品送檢量、溶解方式以及未知可否做質譜檢測的樣品可與我們的工作人員聯系以便提高檢測效率。(送樣單請附帶檢測樣品的品名及精確計算分子量)


            送樣須知:

            A:樣品量:50pmol干粉或1ug/uL以上(一般測試)、100pmol干粉或1ug/uL以上(MALDI串聯質譜分析)、100ug干粉以上(二硫鍵分析、糖基化分析,磷酸化分析,其他修飾分析)、10ug干粉以上(SDS-PAGE或IEF);

            B:鹽含量:揮發性無機鹽,<20mM,請勿使用PBS、SDS和尿素等質譜干擾物質;

            C:考馬斯亮藍染色樣品可全部接收,銀染過程中不得使用glutaraldehyde作為固定劑;

            D:請告知樣品是否有修飾,并請注明修飾方式。


            主要應用 :
            * 蛋白質組學研究

            * 寡聚糖和糖蛋白的研究

            * 小分子化合物分析

            * 藥物發現和研發

            * 食品和環境樣品分析


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            細胞劃痕實驗 條件性敲除小鼠/大鼠
            細胞生物學整體實驗 全基因敲除小鼠/大鼠
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            原位雜交 基因敲除大鼠/小鼠
            熒光原位雜交 基因敲入大鼠/小鼠
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            【本平臺合作項目】
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